شناسایی آلودگی مایکوپلاسما اوراله در کشت های سلولی با استفاده از روش pcr

Authors

آزاده فضلی

azadeh fazli department of microbiology, islamic azad university, karaj, iranدانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، ایران سید علی پور بخش

seyed ali pourbakhsh mycoplasma reference laboratory, razi vaccine and serum research institute, karaj, iranآزمایشگاه رفرنس مایکوپلاسما، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج، ایران اسماعیل اصلی

esmaeil asli mycoplasma reference laboratory, razi vaccine and serum research institute, karaj, iranآزمایشگاه رفرنس مایکوپلاسما، مؤسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج، ایران اعظم حدادی

azam hadadi department of microbiology, islamic azad university, karaj, iranگروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، کرج، ایران

abstract

زمینه و اهداف: آلودگی کشت های سلولی توسط مایکوپلاسماها مسئله ای مهم در فناوری کشت سلولی محسوب می شود. میزان بالایی از کشت های سلولی آلوده به مایکوپلاسما اوراله هستند که عموماً توسط کارکنان آزمایشگاه صورت می گیرد. بنابراین شناسایی و تشخیص آن به منظور جلوگیری از زیان های مهم به دنبال آلودگی با این ریزاندامگان ها(microorganisms) بسیار حائز اهمیت است. هدف این مطالعه راه اندازی و به کارگیری روش واکنش زنجیره پلی مراز به عنوان روشی سریع، حساس و اختصاصی برای تشخیص مایکوپلاسما اوراله در آلودگی های کشت سلولی و فراورده های زیست شناختی است. مواد و روش کار: با به کارگیری سویه استاندارد مایکوپلاسما اوراله، تست pcr با استفاده از جفت پرایمرهای اختصاصی گونه مایکوپلاسما اوراله در ناحیه ژن 16s rrna راه اندازی گردید. 62 نمونه کشت سلولی مشکوک به آلودگی مایکوپلاسما ارجاعی به آزمایشگاه رفرنس مایکوپلاسما موسسه رازی پس از استخراجdna مورد آزمایش pcr قرار گرفتند. یافته ها: تست pcr راه اندازی شده باdna مایکوپلاسما اوراله دارای واکنش مثبت بود، در صورتی که با سایر گونه های مایکوپلاسما نظیر: مایکوپلاسما سالیواریوم، مایکوپلاسما هیورینیس، مایکوپلاسما آرژنینی، آکولوپلاسما لایدلاوی، مایکوپلاسما فرمنتانس، مایکوپلاسما پنومونیه و همچنین با اشریشیا کلی و استرپتوکوکوس پنومونیه واکنش نداد که نشان دهنده ویژگی بالای این تست بود. از تعداد 62 نمونه کشت سلولی 42 نمونه از نظر جنس مایکوپلاسما و 8 نمونه از نظر گونه مایکوپلاسما اوراله مثبت بودند. نتیجه گیری: با توجه به میزان بالای آلودگی کشت های سلولی به مایکوپلاسما اوراله و ویژگی بالای تست pcr راه اندازی شده در این مطالعه، به کارگیری این روش در تشخیص آلودگی کشت های سلولی در آزمایشگاه های کشت سلولی توصیه می گردد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

شناسایی آلودگی مایکوپلاسما اوراله در کشت‌های سلولی با استفاده از روش PCR

زمینه و اهداف: آلودگی کشت‌های سلولی توسط مایکوپلاسماها مسئله‌ای مهم در فناوری کشت سلولی محسوب می‌شود. میزان بالایی از کشت‌های سلولی آلوده به مایکوپلاسما اوراله هستند که عموماً توسط کارکنان آزمایشگاه صورت می‌گیرد. بنابراین شناسایی و تشخیص آن به‌منظور جلوگیری از زیان‌های مهم به دنبال آلودگی با این ریزاندامگان‌ها(Microorganisms) بسیار حائز اهمیت است. هدف این مطالعه راه‌اندازی و به‌کارگیری روش واکنش...

full text

شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشت‏های سلولی با استفاده از روش pcr

هدف: مایکوپلاسما سالیواریوم یکی از گونه‏های مایکوپلاسمای اصلی آلوده کننده کشت‏های سلولی محسوب می‏شود و می‏تواند آثار نامطلوبی را روی کشت‏های سلولی ایجاد کند؛ در نتیجه شناسایی این آلودگی و سرعت تشخیص آن، در کنترل و پیشگیری از این موضوع اهمیت دارد. هدف از این مطالعه شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشت‏های سلولی با استفاده از روش واکنش زنجیره پلیمرازی (pcr) بود. مواد و روش‏ها: به منظور را...

full text

توسعه یک روش PCR جهت تشخیص آلودگی های مایکوپلاسما در رده های سلولی و فراورده های بیولوژیکی

سابقه و هدف : آلودگی لاین های سلولی و فراورده های بیولوژیکی یکی از مشکلات عمده تکنیک کشت سلولی می باشد. تشخیص سریع و دقیق آلودگی مایکوپلاسما قسمت مهمی از کنترل آزمایشگاه های کشت سلول است، وباید روشی در هر آزمایشگاه کشت سلول وجود داشته باشد. سلول های آلوده منتهی به نتایج غیر قابل اطمینان می شود، بنابراین نیاز به یک روش مطمئن در آزمایشگاه امری ضروری می باشد. واکنش زنجیره ای پلیمراز یک تکنیک سری...

full text

شناسایی لیستریا مونوسیتوژنز از شیر خام به روش های کشت سلولی و PCR ژن actA

مواد غذایی از راه های مختلفی در معرض آلودگی میکروبی قرار می گیرد. یکی از باکتری های بیماری زا که از طریق مواد غذایی از جمله: شیر خام، سبزیجات به انسان منتقل می شود، باکتری لیستریا مونوسایتوژنز است که باعث بیماری های مختلفی از جمله: مننژیت، کنژونکتیویت، سپتی سمی و سقط جنین می باشد. با توجه به گزارشاتی که از آلودگی های شیر و فرآورده های آن به لیستریا مونوسایتوژنز داریم، به خصوص در کشورهای در حال ...

full text

شناسایی ژنوم مایکوپلاسما در اسپرم مردان نابارور به روش PCR

زمینه و اهداف: عفونت ژنیتال یکی از علل مهم ناباروری در مردان است. یک گروه از باکتری های مهم عامل ناباروری مایکوپلاسماها می باشند. این عفونت ها خصوصا انواع مزمن آنها با اثرات مخرب بر پارامترهای کیفی اسپرم و یا تنگی و انسداد مجاری ژنیتال باعث عقیمی مرد می شوند. از طرف دیگر با انتقال به همسر وی باعث عفونت ژنیتال، ناباروری و سقط می گردند. هدف از این تحقیق جداسازی مایکوپلاسماها از اسپرم مردان نابار...

full text

استفاده از روش nested-pcr برای تشخیص آلودگی کشت های سلولی به ویروس pestivirus

در این مطالعه یک روش nested-pcr برای تشخیص دو ویروس bvdv از سویه nadl بهینه سازی گردید. در آزمایش rt-pcr، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه '5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول pcr در وکتور r/t57ptz کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش nested-pcr انجام گردید و یک قطعه dna به طول 155 جفت باز تکثیر شد. م...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله میکروب شناسی پزشکی ایران

جلد ۷، شماره ۱، صفحات ۷-۱۴

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023